而據(jù)第三軍醫(yī)大學醫(yī)學分析測試中心萬瑛教授介紹,多色流式(Multi-color Flow Cytometry)指同時使用多種(四色以上)顏色熒光標記的流式檢測與分析,該技術是隨著新熒光分子的不斷問世和流式細胞儀分析參數(shù)的增加而出現(xiàn)的,是目前實現(xiàn)多參數(shù)細胞表型檢測的主要手段。
不過,傳統(tǒng)的流式技術主要基于對熒光發(fā)射光譜的檢測,但熒光基團發(fā)射光譜一般比較寬,其間往往會發(fā)生重疊。不僅限制了檢測通道的數(shù)量(<20個),還會帶來嚴重的串色問題,很多通道的信號需要復雜的補償計算。
為了解決這些問題,最新的質(zhì)譜流式細胞術(CyTOF)應運而生。據(jù)萬瑛介紹,傳統(tǒng)的流式技術主要使用各種熒光基團作為抗體的標簽,使用激光器和光電倍增管作為檢測手段,而CyTOF用金屬元素偶聯(lián)抗體作為標記手段,以ICP質(zhì)譜為檢測手段,通過這些改進,質(zhì)譜流式技術巧妙的實現(xiàn)了更多參數(shù)的檢測。總體來說,CyTOF具有很多優(yōu)勢:通道多,通道數(shù)>110個,檢測范圍88-210Da;無漏光,通道間相互影響小于0.3%,無需計算補償;背景低,標記元素在細胞內(nèi)含量極低(<1原子/細胞)等。不過,目前國內(nèi)的CyTOF產(chǎn)品還比較少。
不過,傳統(tǒng)的流式技術主要基于對熒光發(fā)射光譜的檢測,但熒光基團發(fā)射光譜一般比較寬,其間往往會發(fā)生重疊。不僅限制了檢測通道的數(shù)量(<20個),還會帶來嚴重的串色問題,很多通道的信號需要復雜的補償計算。
為了解決這些問題,最新的質(zhì)譜流式細胞術(CyTOF)應運而生。據(jù)萬瑛介紹,傳統(tǒng)的流式技術主要使用各種熒光基團作為抗體的標簽,使用激光器和光電倍增管作為檢測手段,而CyTOF用金屬元素偶聯(lián)抗體作為標記手段,以ICP質(zhì)譜為檢測手段,通過這些改進,質(zhì)譜流式技術巧妙的實現(xiàn)了更多參數(shù)的檢測。總體來說,CyTOF具有很多優(yōu)勢:通道多,通道數(shù)>110個,檢測范圍88-210Da;無漏光,通道間相互影響小于0.3%,無需計算補償;背景低,標記元素在細胞內(nèi)含量極低(<1原子/細胞)等。不過,目前國內(nèi)的CyTOF產(chǎn)品還比較少。